Estudo eletrofisiológico, histológico, histoquímico e ultraestrutural do miocárdio de pacientes com mutação do gene PRKAG2

Abstract

Fundamentos: A mutação do gene PRKAG2, que codifica a subunidade y2 da proteína quinase ativada por monofosfato de adenosina (AMPK) é uma doença hereditária autossômica dominante, é caracterizada por pré-excitação, taquiarritmias atriais, distúrbios da condução atrioventricular e hipertrofia cardíaca. Metade dos pacientes necessitará de implante de marca passo definitivo e um décimo sofrerá morte súbita,antes da quarta década. Diagnóstico precoce é importante para permitir acompanhamento e abordagem adequadas. O sequenciamento genético é considerado padrão ouro, mas não está disponível pelo Sistema Único de Saúde. Não se conhece a eficácia da biópsia em identificar a cardiomiopatia pelo PRKAG2.Objetivo: Avaliar ressonância magnética cardíacacom mapa T1, volume extracelular (VEC) e realce tardio (RT) após gadolíneo da cardiopatia pelo PRKAG2. Analisar alterações histológicas, histoquímicas e ultraestruturais em fragmentos de tecido endomiocárdico de pacientes com mutação na subunidade ɣ2 no gene PRKAG2. Comparar a eficácia diagnóstica da biópsia endomiocárdica com o sequenciamento genético. Metodologia: O primeiro estudo foi uma análise retrospectiva transversal de 30 pacientes com miocardiopatia pelo PRKAG2. O segundo estudo foi um observacional transversal caso controle. Incluímos 18 pacientes com mutações do gene PRKAG2 (Arg302Gln e His401Gln). Os controles consistiram de biópsias de 11 recém-transplantados cardíacos, e de 3 portadores de cardiomiopatia hipertrófica. Apenas em 1 dos 3 pacientes com cardiomiopatia hipertrófica identificou-se uma mutação patogênica -MYL3 Ala57Asp. Utilizou-se sequenciamento de nova geração nos probandos com cardiomiopatia doPRKAG2ehipertróficos, enquanto familiares foram submetidos a sequenciamento em cascata utilizando técnica de Sanger. As biópsias foram submetidas à análise histológica, histoquímica e ultraestrutural. Resultados: Hipertrofia do VE foi detectada em 16 indivíduos (53.3%) e aumento da espessura miocárdica em 25 (83.3%),hipertrofia grave em 9 (30%) e extrema em 3. Os padrões de hipertrofia foram septal, apical e concêntrico difuso, sem obstrução da via de saída do VE.Mapa T1eVECestavam normais em todos. RT foi encontrado em 16.6% (5/30), todos com hipertrofia grave (5/9), comparados com 0/21 pacientes com hipertrofia leve ou sem hipertrofia (p=0.009).Os fragmentos de biópsia da cardiomiopatia do PRKAG2 mostraram importante aumento do diâmetro dos cardiomiócitos, pronunciada vacuolização, ausência de fibrose intersticial (exceto em dois pacientes, que tiveram fibrose focal de baixa intensidade), ausência de desarranjo arquiteturale infiltrado inflamatório, quando comparado com os controles normais (pós transplante).Microscopia eletrônica mostrou grandes quantidades de grânulos de glicogênio no citoplasma, principalmente em região perinuclear. Lagos de glicogênio também foram identificados no espaço interfibrilar e em regiões subsarcolêmica. Grande quantidade de glicogênio observada nos pacientes com cardiomiopatia pelo PRKAG2 não foi vista em nenhum dos controles. A utilização de critérios como vacuolização extensa, ausência de inflamação, fibrose e desarranjo estrutural e grande quantidade de glicogênio no citoplasma identificou todos os casos de cardiomiopatia pelo PRKAG2, mesmo nos pacientes sem hipertrofia ao ecocardiograma. Conclusão:Ressonância cardíaca com mapa T1 auxiliam na identificação de pacientes com mutação do PRKAG2 dentre casos de hipertrofiasem etiologia definida.Biópsia endomiocárdica foi tão eficiente quanto o sequenciamento genético na identificação de cardiomiopatia pelo PRKAG2.